快捷

实验以食品、中药医药工业常用抗氧化剂Vc做对照，橘红究对各提取物部分抗氧化活性进行比较，抗氧发现浓度较小或较大时，化作对照Vc的用初清除率与各提取物清除率差异较大或不明显。因样品数量较多，步研为了便于比较，中药浓度最终选为1.00mg/mL，橘红究实验结果见下图。抗氧

从上图可以看出，化作在所测浓度下各提取物均具有一定的用初抗氧化活性。其中对DPPH自由基清除作用大小顺序为：3b>4b>4a>3a>2b>5b>2a>5a>1b>6a>1a>6b，步研金属离子螯合能力大小顺序为：3b>4a>3a>4b>1b>2a>2b>5a>6a>1a>5b>6b，中药对黄嘌呤氧化酶的橘红究抑制作用大小顺序为：3b>3a>4b>4a>2b>5b>6a>6b>1a>1b>2a>5a。可以看出对三种不同的抗氧抗氧化模型，乙酸乙酯提取物部分样品3a、3b和无水乙醇提取物部分样品4a、4b均具有较好的抗氧化作用，但其作用均低于同浓度的Vc。同一个样品对三种抗氧化模型的作用大小为：DPPH自由基清除作用>金属离子螯合能力>对黄嘌呤氧化酶的抑制作用，即清除DPPH自由基结果较显著。

2.2各薄层层析制备样品抗氧化活性结果与分析

从2.1实验结果可以看出3a、3b、4a和4b清除DPPH自由基效果较显著，将此四部分进一步经薄层层析制备分离，3a部分用石油醚/乙酸乙酯=5︰1展开得到样品3a-1.3b部分用石油醚/乙酸乙酯=1︰2展开得到样品3b-2和3b-3.4a部分用氯仿/甲醇=4︰1展开得到样品4a-4和4a-5.4b部分用氯仿/甲醇=1︰7展开得到样品4b-6，共六个样品，它们的薄层层析图及Rf值见图2。

从上表可以看出，制备薄层层析法所得各样品对DPPH自由基均有清除作用。在1.00mg/mL浓度时，各样品对DPPH自由基清除率大小顺序为：3b-2>4a-4>3b-3>4b-6>3a-1>4a-5，其中样品3b-2和4a-4清除率较高。

以Vc做对照，对样品3b-2和4a-4在不同浓度下清除DPPH活性进行比较，发现浓度较小或较大时，清除率太小或差异变化不明显。为了便于比较，浓度选为0.125、0.25、0.5、1.00、2.00mg/mL，实验结果见图3。

从上图可以看出，3b-2和4a-4清除DPPH自由基作用与浓度呈较好的量效关系，但在同浓度下清除率均低于对照Vc。

2.3活性样品的结构类型鉴定结果与分析

从2.2结果可以看出样品3b-2和4a-4在测定浓度下对DPPH自由基清除作用较强。通过观察它们的理化性质和颜色反应，初步鉴定出样品的结构类型。颜色反应结果见表3。

从表3结果可以看出样品3b-2和4a-4主要为黄酮类化合物。

3结论

本研究以体外抗氧化作为活性筛选模型，先测试相同浓度下橘红各提取物部分清除2.2-二苯基-1-苦基肼自由基作用、金属离子螯合能力和对黄嘌呤氧化酶的抑制活性，以期得到抗氧化作用较明显的提取物部分和实验模型；然后将效果较好的提取物部分经薄层层析进一步分离，测试所得样品对效果较好的实验模型的抗氧化活性。这种筛选活性部位的实验方法能缩小活性范围，实验针对性强，目的明确，可以较快得到活性较好部位。实验结果表明在所测浓度范围内，橘红中的两个黄酮类成分对DPPH自由基有较明显的清除作用，并且清除率均随着浓度的增大而增强，具有较好的量效关系，可以进一步进行结构及开发应用研究，为其作为天然抗氧化剂在食品和医药行业的应用提供理论依据。

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